リン酸塩緩衝液によるレセルピン不純物のLC/MS分析／MS分析ならエムエス・ソリューションズ | 受託分析・開発に特化した事業を展開

リン酸塩などの不揮発性塩を含む移動相は、基本的にLC/MSには使えません。エムエス・ソリューションズで開発したソルナックチューブは、その不可能を可能にする製品です。

図のように、HPLCとMSの間にソルナックチューブを接続すると、移動相に含まれるリン酸塩はチューブ内のイオン交換樹脂に吸着され、リン酸塩を除いた移動相がMSに導入されます。

シナプス小胞へのカテコールアミンやセロトニンの取り込みを抑制する作用をもつ、アドレナリン作動性ニューロン遮断薬の1つであるレセルピン（reserpine）を試料として、局方で採用されているリン酸塩緩衝液を用いたLC条件で分析を行いました。

【LC条件】  　

装置　  ： Agilent 1200

カラム  ： CERI L-column2 ODS, 40 ℃

　　　　　      　(3μm, 4.6 mm i.d.×150 mm)

移動相  ： A ･･･ 10mM KH2PO4水溶液

　               B ･･･ CH3CN 

         　　　　A/B=80/20 ⇒ 20/80 (0’⇒10’)

流量  ： 0.8ml/min    

検出器   ： UV（215 nm）

試料  ： レセルピン試薬 50 ppm溶液

注入量  ： 10 μL

【MS条件】　  

装置  ： JEOL JMS-T100LP

イオン化法  ： ESI  Pos.

ニードル電圧  ： 2000 V　

オリフィス１電圧    ： 85 V

脱溶媒室温度　  ： 350 ℃

オリフィス１温度  ： 80 ℃

測定範囲  ： m/z 50～1000

ソルナックカートリッジ  ： CFAN46030

レセルピンの構造は既知ですので、その[M+H]⁺  (m/z 609.2807)の精密質量を内標準として、不純物①と②のマススペクトルのm/z 値を補正しました。2つの不純物の推定組成は、C₃₃H₄₁N₂O₁₀ (+0.93 ppm), C₃₂H₃₉N₂O₈ (+5.1 ppm)であり、それぞれレセルピンからの構造変化は+O (+16 Da)、-CH₂O (-30 Da)であると推測されます。不純物③は、①と同じマススペクトルでした。両者は異性体の関係にあると推測されます。